一、METTL1：PTEN/AKT 通路调控肝癌转移的核心分子
1. METTL1 在肝癌中高表达，与不良预后密切相关
研究团队在 892 例肝癌患者的两个独立队列中发现，METTL1 的 mRNA 和蛋白水平在肝癌组织中显著高于癌旁正常组织，且在转移性肿瘤中的表达进一步升高（87.5% 的新鲜肝癌标本中 METTL1 mRNA 上调）。临床相关性分析显示，METTL1 高表达与更大的肿瘤体积、更高的血清 AFP 水平、肿瘤血管侵袭显著相关（P 值分别为 0.010、0.001、0.025）。生存分析表明，METTL1 高表达组患者的 5 年总生存率（33%）显著低于低表达组（58%），且在多变量分析中，METTL1 是肝癌总体生存的独立预后因素，其与 PTEN 的表达组合（低 METTL1 + 高 PTEN）具有更优的预后预测价值。
2. METTL1 通过抑制 PTEN 激活 PI3K/AKT 通路促进恶性表型
体外功能实验显示，过表达 METTL1 可显著增强 HepG2、Huh7 等肝癌细胞的增殖活力、克隆形成能力及迁移能力；而沉默 METTL1 则呈现相反表型。分子机制研究通过基因集富集分析（GSEA）证实，METTL1 低表达患者中 PTEN 通路显著激活，提示两者存在负向调控关系。挽救实验表明，异位表达 PTEN 或抑制 AKT 活性，可显著减弱 METTL1 介导的细胞增殖与迁移，证实 METTL1 通过下调 PTEN 表达、激活 PI3K/AKT 通路发挥促癌作用。临床样本中，METTL1 与 PTEN 的基因组改变相互排斥，高 METTL1 患者常伴随低 PTEN 表达，进一步验证了两者的调控关联。
二、AAMDC：mTOR 通路驱动肝癌转移的新靶点
1. AAMDC 在肝癌中异常高表达，提示不良预后
泛癌分析显示，AAMDC 在肝细胞癌（LIHC）等多种肿瘤中显著高表达，且其高表达与肝癌患者的无疾病生存期缩短密切相关。在肝癌细胞系中，AAMDC 的 mRNA 和蛋白水平均显著高于正常肝细胞 L-02，免疫组化结果证实，高 AAMDC 表达的肝癌患者无疾病生存期显著缩短，且 AAMDC 主要定位于肝癌细胞的细胞质中。
2. AAMDC 通过与 FASN 互作激活 mTOR 通路促进侵袭转移
Transwell 实验表明，过表达 AAMDC 可显著增强 HepG2、PLC-8024 细胞的迁移和侵袭能力；而在 SNU387、Huh7 细胞中敲低 AAMDC，则显著抑制其转移潜能。机制上，通过免疫共沉淀联合质谱分析，鉴定出脂肪酸合成酶 FASN 是 AAMDC 的关键相互作用蛋白，两者的结合得到进一步验证。油红 - O 染色显示，过表达 AAMDC 可促进肝癌细胞脂质积累，提示其参与调控脂质代谢。转录组测序及 GSEA 分析证实，AAMDC 过表达可显著激活 mTOR 信号通路，Western blot 实验进一步验证了这一结论，表明 AAMDC 通过与 FASN 互作，激活 mTOR 通路促进肝癌侵袭转移。
三、延伸研究：CAND1 调控 PD-L1 稳定性的初步探索
除肝细胞癌研究外，课题组还初步探索了泛素化相关蛋白 CAND1 在乳腺癌中的功能。结果显示，CAND1 在乳腺癌组织中高表达，与患者不良预后相关，且与 PD-L1 蛋白表达显著正相关。CoIP 及 Duolink PLA 实验证实 CAND1 与 PD-L1 存在相互作用，沉默 CAND1 可通过促进 PD-L1 泛素化降解缩短其蛋白半衰期，进而下调 PD-L1 蛋白表达，提示 CAND1 可能通过稳定 PD-L1 促进乳腺癌免疫逃逸，为后续深入研究奠定基础。
