少一点试错

多一点突破


介绍 /Introduction

研究亮点
1.将lucCage–lucKey蛋白开关拓展用于小分子的均相检测。
2.建立了无需改造单克隆抗体的小分子均相免疫分析方法。
3.模块化的模拟表位嫁接策略使该平台可便捷适配于其他小分子靶标。
4.检测体系中所有关键元件均可通过生物合成方式制备,构建了全基因编码的绿色检测流程。
研究图文/Introduction

图 1. 模拟表位单端嫁接型lucCage 传感器(a)和双端融合模拟表位型lucCage 传感器(b)的作用机制示意图。


图 2. 模拟表位单端嫁接型 lucCage传感器的设计与筛选。


图3. 模拟表位单端嫁接型lucCage−lucKey 传感器用于FB1 检测。


结论 /Conclusion
本研究构建了一种基于模拟表位和lucCage-lucKey 蛋白开关驱动的均相生物发光免疫传感平台,实现了小分子真菌毒素 FB1的快速、灵敏、均相免疫检测。研究团队最终获得了两类性能良好的 FB1 均相生物发光传感器。其中,基于模拟表位单端嫁接型优化传感器Cb-lucCageF1_342的检测限达到了2.99 ng/mL,在实际样品检测中,FB₁在玉米和小麦基质中的检测限分别为44.91 μg/kg和30.02 μg/kg,加标回收率分别为81.27%–118.43%和92.15%–124.71%;基于模拟表位双端融合型优化传感器 NCb-lucCageF1_S_L2的检测限为9.73 ng/mL,对FB1检测灵敏度相较于优化前提高了 1.7 倍。两类传感器均表现出良好特异性,对 AFB1、DON、OTA 和ZEN 等常见真菌毒素无明显交叉反应。
总体而言,本研究为小分子均相免疫分析提供了一种新的蛋白工程设计路径,也为食品安全、环境监测及体外诊断领域中小分子污染物的快速检测提供了可拓展的技术平台。
文献直通车 /Literature information
Mimotope-Driven lucCage-lucKey Homogeneous Bioluminescent Immunosensor for the Small Molecule Fumonisin B1
Binhui Huang, Minwen Sun, Xuhong Liu, Chong Cai, Tailong Wei, Meijuan Huang, Zhui Tu, Yanping Li, and Qinghua He*
原文链接:https://doi.org/10.1021/acs.analchem.6c01299
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