9.1/Q1 南昌大学和中科院团队重磅!横扫三类恶病质肌肉萎缩!RNA-seq 锁定核心通路:蛇源肽 OH-CATH30 靶向 TLR4

前言

脓毒症相关急性肝损伤（SALI）由免疫紊乱引发，死亡率高且缺乏特效治疗。 Buddleoside（Bud，蒙花苷）具抗炎、抗氧化活性，对肝脏疾病有保护作用，但在 SALI 中的免疫调控机制尚不明确，需通过单细胞层面解析其作用靶点。

构建盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的 SALI 小鼠模型，给予不同剂量 Bud 或阳性药水飞蓟素干预；通过血清生化检测、HE 染色评估肝损伤程度；采用 scRNA-seq 分析肝组织单细胞转录组特征，结合免疫荧光验证细胞定位；利用 GSVA 计算炎症和细胞因子评分，通过 CellChat 分析细胞间通讯网络，借助 Monocle 2 进行细胞分化轨迹分析。

 1.Bud 显著缓解 SALI 小鼠肝损伤

CLP 模型小鼠血清 ALT、AST 水平显著升高，肝组织出现小叶结构紊乱、肝细胞变性及大量炎症浸润。Bud 以剂量依赖方式降低转氨酶水平，高剂量组 ALT 较模型组下降超 50%；同时改善肝组织病理形态，减少炎症细胞浸润，效果与水飞蓟素相当，证实 Bud 对 SALI 具明确保护作用。

2.scRNA-seq 揭示 Bud 调控肝组织关键细胞亚群

单细胞测序鉴定出 15 类肝组织细胞，包括内皮细胞（ECs）、中性粒细胞、巨噬细胞等。Bud 处理后，ECs、巨噬细胞和中性粒细胞比例发生显著改变，其中促炎亚群减少，提示 Bud 通过重塑这些关键细胞亚群功能发挥作用，为后续机制研究锁定核心靶点。

3.Bud 抑制内皮细胞活化并调节功能表型

scRNA-seq 将 ECs 分为 11 个亚群，Bud 显著降低促炎型 Cox8a+Endo 和 Ccl2+Cxcl1+Endo 亚群比例。机制上，Bud 下调 ECs 中促炎黏附分子 Selp 表达，同时上调抗氧化的 Selenop 和降解中性粒细胞胞外陷阱（NETs）的 Dnase1l3，抑制白细胞招募和氧化应激，维持肝窦内皮屏障完整性。

中性粒细胞被分为 7 个亚群，其中 Ccl4+Cxcl1+Neu 亚群炎症评分最高，富集于中性粒细胞脱颗粒、细胞因子信号等通路。Bud 处理后，该亚群炎症评分显著降低，S100a9、Ngp 等促炎基因表达下调，减少中性粒细胞介导的肝组织损伤。

5.Bud 调控巨噬细胞亚群异质性以减轻炎症