南昌大学第二附属医院心肌纤维化新调控轴:MYC-METTL1 介导 m7G 修饰调控 HILPDA 驱动心梗后心室重构

研究背景

心梗小鼠心肌组织与原代心脏成纤维细胞中 METTL1、HILPDA、MYC 表达显著上调，HILPDA 于心梗后 7 天达到表达峰值；HILPDA 主要在心脏成纤维细胞发挥作用，过表达会诱导线粒体 ROS 升高、膜电位下降、ATP 合成减少，促进成纤维细胞增殖迁移与肌成纤维细胞转化，敲低则逆转上述损伤；METTL1 通过 m7G 修饰结合并稳定 HILPDA mRNA，提升 HILPDA 蛋白表达，缺失 HILPDA 可抵消 METTL1 促纤维化效应；MYC 直接结合 METTL1 启动子促进其转录，MYC 上调同步升高 METTL1、HILPDA 与整体 m7G 修饰水平；成纤维细胞特异性 AAV 敲低 HILPDA 可改善心梗小鼠左室射血分数、缩小梗死面积、减轻胶原沉积、恢复线粒体功能，且不反馈调控上游 MYC、METTL1。

Figure1：公共数据集与小鼠心梗时序模型验证心梗后心肌组织及原代成纤维细胞内 HILPDA 显著上调，同时病理染色证实心梗组存在心肌坏死、炎症浸润与胶原沉积，初步提示 HILPDA 参与心梗纤维化进程。

Figure2：体内成纤维细胞特异性敲低 HILPDA 可改善心梗小鼠心功能、缩小梗死面积，减轻心肌病理损伤与胶原沉积，共定位染色证明 HILPDA 主要表达于成纤维细胞，敲低后显著抑制成纤维细胞与内皮细胞增殖，明确 HILPDA 体内促纤维化作用。

Figure3：体外缺氧诱导成纤维细胞模型证实 HILPDA 过表达加剧线粒体功能损伤、脂质蓄积、细胞增殖迁移及肌成纤维细胞活化，敲低可逆转全部缺氧诱导的促纤维化表型，明确 HILPDA 介导线粒体紊乱驱动成纤维细胞活化。

Figure4：体内验证心梗后 METTL1 与整体 m7G 修饰水平升高，体外 RIP 证实 METTL1 结合 HILPDA mRNA；METTL1 过表达通过 m7G 修饰提升 HILPDA mRNA 稳定性，加重线粒体损伤与纤维化表型，敲低 HILPDA 可完全阻断 METTL1 的促纤维化效应，阐明 METTL1 的下游效应分子为 HILPDA。

Figure5：生物信息、ChIP、双荧光素酶实验证实 MYC 直接转录激活 METTL1；MYC 过表达同步上调 METTL1、HILPDA 与 m7G 修饰水平，加剧成纤维细胞活化，敲低 MYC 抑制整条通路活化，确立 MYC 为 METTL1 上游转录调控因子。

Figure6：体内敲低 HILPDA 不改变 MYC、METTL1 表达，仅降低 HILPDA 水平，同时缓解心梗后心肌 ROS 蓄积、ATP 合成不足，下调胶原与成纤维细胞活化标志物，反向验证 HILPDA 是该通路发挥心脏损伤效应的关键执行分子。