固定化脂肪酶构建：以单宁酸（TA）功能化氨基树脂（AR）为多功能载体，通过调控十八胺（ODA）接枝量（0.4 mmol/g AR-TA）精确调控载体表面 疏水性，实现脂肪酶RML的共价固定化。固定化最优工艺条件为：酶液/载体比例10 mL/g，固定化时间8 h，固定化温度35 ℃，pH=7.0。在此条件下，固定化脂肪酶RML@AR-TA-ODA的酶活达11638.53 U/g，酶负载量为62.54 mg/g；与未改性AR固定化酶（RML@AR）相比，酶活性提高了80%。
载体及固定化脂肪酶表征：SEM表明改性及固定化过程未破坏树脂孔道形貌；接触角分析显示ODA改性后载体接触角显著增大至136.7°，固定化酶后降至114.8°，证实疏水表面成功构建；TGA显示固定化酶后残留量增加，表明脂肪酶已成功负载；FTIR证实了希夫碱和迈克尔加成反应的发生，且固定化后α-螺旋含量降低1.24%，β-折叠含量增加，表明脂肪酶“盖子”结构打开、活性中心暴露；BET分析表明比表面积和孔容依次减小，进一步证明脂肪酶的成功固定化。
脂肪酶在载体上的吸附行为：吸附动力学符合拟二级模型，且颗粒内扩散模型表明边界层扩散和颗粒内扩散均为限速步骤；吸附等温线符合Freundlich模型，表明载体表面有利于脂肪酶吸附；吸附热力学参数ΔG为负值、ΔH为正值（89.94 kJ/mol），表明固定化过程是吸热、化学作用驱动且自发进行的过程。
Sn-2位富含必需脂肪酸的中长链结构脂质制备：以癸酸与紫苏籽油为原料，RML@AR-TA-ODA为催化剂，制备中长链结构脂质。最适工艺参数为：癸酸与紫苏籽油摩尔比5:1，反应时间8 h，反应温度60 ℃，酶添加量8%。在最适工艺下，产物中癸酸含量达43.62%，sn-2位主要被必需脂肪酸占据（亚油酸16.81%、亚麻酸56.41%），MLCT总产率高达93.57%，其中MLM型结构脂质占52.2%。
固定化脂肪酶的稳定性：RML@AR-TA-ODA具有良好的热稳定性、储存稳定性和操作稳定性。在60 ℃下孵育10 h后酶活保留率为79.15%，半衰期（57.27 h）分别是RML@AR和游离RML的4.9倍和10.14倍；在4 ℃和25 ℃下储存60天，酶活保留率分别为91.87%和86.24%；泄漏实验证实共价键合有效防止酶泄漏，72 h泄漏率仅7.80%。在制备结构脂质的最适工艺下，循环使用10次后残余活性仍达92.53%，显著优于商业化Lipozyme RM C（残余活性32.9%）。
研究意义：本研究通过单宁酸氧化涂层与十八胺疏水改性的协同策略，构建了一种兼具高活性与高稳定性的固定化脂肪酶体系。系统考察了脂肪酶固定化过程中的动力学与热力学特性，并将其成功应用于中长链结构脂质的酶法合成，为开发环境友好、可循环使用的高效生物催化剂提供了创新策略。
